Назначение: Набор Actichrome® TF предназначен для количественного определения прокоагулянтной активности тканевого фактора (TF) в клеточных лизатах и человеческой плазме хромогенным методом. Длина волны измерения 405 нм. Диапазон измерения: 2 – 30 пмоль/л Чувствительность: 2 пмоль/л Приложения теста: Тканевой фактор (TF) - трансмембранный гликопротеин массой 45 кДа, последние 90 лет известный своей ролью в инициировании процесса свертывания. TF включает три домена: внеклеточный домен (1-219 а.к.), гидрофильный стягивающий домен (220-242 а.к.) и цитоплазматический «хвост» (243-263 а.к.). Он действует как рецептор и кофактор для латентного фактора сериновых протеаз VII и VIIa. Контакта TF и крови достаточно для того, чтобы началась внешняя коагуляция. TF содержится в клетках адвентициальной оболочки и в некоторых клеточных культурах. Исследования in vitro показывают, что, как только TF связывается с фактором VII, фактор VII эффективно активируется фактором Ха. Другие протеазы, включая факторы IXa, XIIa и тромбин, также могут активировать фактор VII. Так же, как и в случае витамин К-зависимых зимогенов, активация требует присутствия ионов кальция и фосфолипидов. Активация фактора VII отличается от активации других витамин К-зависимых зимогенов тем, что он связывается с TF, что вызывает значительные аллостерические изменения, а также его повышенную экспрессию под действием TF. Формирование данного комплекса TF/FVIIa делает связь Arg152 - Ile153 фактора VII восприимчивой к расщеплению следовыми количествами фактора Ха и фактора IXa. Активация фактором Ха становится заметно более эффективной под воздействием липидированного TF, однако не под воздействием растворимого TF (1-219 а.к.). Липидизация TF кислыми фосфолипидами более эффективна, чем везикулы из фосфатидилхолина. Это означает, что для активации фактора VII с помощью фактора Ха необходимо связывание Gla - домена и полярных фосфолипидных групп. Фактор VIIa сам по себе обладает низкой протеолитической активностью. Только при связывании с TF фактор VIIа обладает достаточной протеолитической активностью, чтобы активировать фактор IХ и фактор Х. Несмотря на то, что фактор VIIа обладает некоторой активностью к пептидил - субстратам в присутствии апо-TF протеина и ионов кальция, нельзя сказать того же про физиологические субстраты, такие как фактор IХ и фактор Х. Данные факторы требуют отрицательно заряженных фосфолипидов для полного проявления протеолитической активности фактора VIIа. Гамма - карбоксилирование Gla - домена фактора VII является чрезвычайно важным для проявления полной биологической активности. Мутантный фактор VII, в котором отсутствует Gla - домен, имеет заметно пониженный уровень связывания с TF. Область фактора роста эпидермиса фактора VIIа (51-88 а.к.), возможно, является местом его связывания с TF. Взаимодействие фактора VIIа с TF происходит по различным сайтам связывания: N – терминальный Gla - домен, домен фактора роста эпидермиса, а также остатки аминокислот, находящиеся в протеазной области фактора VII. В то время как в основном они встречаются в тканях легких, мозга, трофобластических микроворсин плаценты и некоторых неопластических тканях (например, злокачественных опухолях груди и меланомах), недавние исследования показали повышенные уровни фактора в тканях пациентов, которым был поставлен диагноз злокачественная солидная опухоль. Когда моноциты и макрофаги стимулируются эндотоксинами, цитокинами и лектинами, экспрессия TF в таких клетках повышается, при этом прокоагулянтная активность (ПКА) повышается. Клеточное распределение TF в экстраваскулярных отделах (например, эпидермисе, плаценте и капсулах органов, а также в центральной нервной системе) предполагает, что TF является гемостатическим барьером. Исследования показали, что у пациентов, которым был поставлен диагноз генерализованный тромбогеморрагический синдром (ГТС), уровень TF в плазме увеличен. Тканевой фактор попадает в кровоток в результате повреждения эндотелия. Инициация процесса коагуляции требует участия ряда молекул: TF с его способностью связываться с фактором VII, фактором Х или фактором IХ, заряженные фосфолипиды и кальций (каталитическая активность фактора VIIa в сравнении с активностью VII незначительна). Комплекс TF/FVIIa эффективно активирует как фактор Х, так и фактор IX, таким образом, инициируя внутренние и внешние процессы свертывания. Внешний путь регуляции быстро тормозится ингибитором пути тканевого фактора (TFPI). TFPI является единственным эффективным ингибитором TF/FVIIa, который позволяет внутреннему пути регуляции активировать фактор Х через фактор IX.