Назначение: Набор Human IL-1 sRII Immunoassay предназначен для количественного определения растворимого рецептора II интерлейкина-1 в образцах сыворотки, плазмы крови, супернатантов клеточных культур и других биологических жидкостей методом иммуноферментного анализа.
Диапазон измерения: 10 – 2000 пг/мл.
Чувствительность: 10 пг/мл.
Приложения теста: интерлейкин 1 (ИЛ-1) является общим названием для двух разных белков: IL-1α и ИЛ-1β. Каждый белок является продуктом отдельного гена и каждый белок распознает одни и те же поверхностные рецепторы. Хотя синтез IL-1 индуцируется быстро и обычно ассоциируется с воспалением, существуют доказательства, что уровень ИЛ-1 также временно повышается в период формирования костной ткани и в определенные фазы менструального цикла, и это повышение может быть вызвано стимуляцией нервной системы.
Оба цитокина, IL-1α и IL-1β, синтезируются в виде предшественников массой 31 кДа, которые последовательно расщепляются с образованием активных цитокинов с молекулярной массой приблизительно 17 кДа, проявляющих свое действие через связывание со специфическими рецепторами. Были идентифицированы два различных рецептора, которые связывают обе формы IL-1. Общим для них является внеклеточный Ig-подобный домен, благодаря которому оба рецептора IL-1 (IL-1R) относят к семейству рецепторов цитокинов типа IV. Первый рецептор IL-1 (IL-1RI) является трансмембранным гликопротеином массой 80 кДа, который был выделен из астроцитов, хондроцитов, эндотелиальных клеток, фибробластов, кератиноцитов, нейронов, ооцитов, клеток поджелудочной железы, гладкомышечных клеток и Т-клеток. Рецептор второго типа IL-1R (IL-1 RII) является трансмембранным гликопротеином массой 60-68 кДа, который был обнаружен на В-клетках, кератиноцитах, моноцитах, нейтрофилах и Т-клетках. Два рецептора имеют около 28% гомологии своих внеклеточных доменов, но значительно отличаются своими цитоплазматическими доменами, где IL-1RI содержит 215 аминокислотных остатков по сравнению с только 29 аминокислотными остатками для IL-1RII. В зависимости от биологического вида и типа клеток два рецептора демонстрируют разные связывающие характеристики для IL-1α и IL-1β. В целом, IL-1α связывается лучше с рецептором типа I и IL-1β связывается лучше с рецептором типа II. В сыворотке выявлены растворимые формы как IL-1RI, так и IL-1RII. Растворимый рецептор типа II имеет массу 47 кДа и показывает высокую аффинность связывания для обеих форм IL-1. Из мышиных клеток был выделен гликопротеин массой 65 кДа, который может являться частью комплекса IL-1R в качестве вспомогательного белка. Молекула длиной в 550 аминокислотных остатков на 25% идентична аминокислотной последовательности обоих рецепторов IL-1RI и IL-1RII и обладает Ig-подобным внеклеточным доменом. Этот вспомогательный белок образует комплекс с IL-1RI и IL-1 и увеличивает аффинность связывания этого рецептора для IL-1.
Так как IL-1RII имеет настолько маленький цитоплазматический домен без явной способности к передаче сигнала, что было высказано предположение, что этот рецептор действует в качестве рецептора-ловушки, который модулирует активность IL-1, особенно IL-1β. Несколько наблюдений подтверждают это предположение.
Растворимый IL-1RII может связывать в виде предшественника IL-1β и ингибировать его процессинг в активную форму. Растворимый IL-1RII показывает существенно сниженную аффинность к IL-1ra в сравнении со мембраносвязанной формой рецептора и может ингибировать активность IL-1β, взаимодействуя с IL-1ra. Таким образом, эти два модулятора активности IL-1 не интерферируют друг с другом. Обработка дексаметазоном полиморфноядерных лейкоцитов человека увеличивает скорость транскрипции IL-1RII, продлевает период полураспада мРНК IL-1RII и усиливает экспрессию мембранносвязанной формы IL-1RII и секрецию растворимой формы IL-1RII. Эти свойства, по-видимому, вовлечены в иммуносупрессивное и противовоспалительное действие этого глюкокортикоида. Кроме того, противовоспалительный цитокин IL-13 также индуцирует экспрессию и релиз IL-1RI полиморфноядерными лейкоцитами. Эти факты свидетельствуют о роли как мембраносвязанной, так и растворимой формы IL-1RII в снижении общей активности IL-1 через связывание с ним и предотвращение его связывания с сигнал-передающей молекулой IL-1RI.
Биологический анализ IL-1 sRII основан на его способности ингибировать IL-1β-зависимую пролиферацию мышиной клеточной линии Т-хелперов D10.G4.1. Эти анализы занимают много времени и не полностью специфичны для IL-1sRII. Иммуноферментный набор Quantikine IL-1 sRII длится 3,5 часа. Он содержит экспрессируемый клетками насекомых рекомбинантный человеческий IL-1 sRII.