Набор реагентов предназначен для ДНК-генотипирования на низком разрешении локуса HLA-DQB1 методом "реал-тайм" ПЦР. Набор предназначен только для научных исследований, не для использования в медицинских целях. Набор позволяет провести количественный анализ на низком разрешении HLA-специфичностей. В наборе используются праймеры внутреннего контроля и зонд к консервативному региону гена, который присутствует во всех человеческих образцах ДНК.
Принцип метода заключается в окрашивании амплифицированной ДНК флуоресцентным зондом во время ПЦР. Аллель-специфичные мишени ДНК амплифицируются с помощью прямого и обратного праймеров, а также Taq полимеразы. Зонды имеют в своем составе флуоресцентный репортер и флуоресцентный гаситель. Зонды, связанные с FAM и JOE детектируют каждую из HLA-аллелей, а внутренний контроль связан с ROX (CalRed610).
Требование к образцам ДНК: концентрация должна быть 50-100 нг/мкл, чистота по A260/A280 1,6 - 2,0, необходимый объем не менее 100 мкл.
Набор совместим с реалтайм амплификаторами Applied Biosystems 7500, Quant Studio 5 и Bio-Rad CFX96.
Набор рассчитан на постановку не менее 20 тестов.
Компоненты набора: 1) мастер-микс содержит ПЦР буфер, MgCl2, dNTP, зонды внутреннего контроля и воду (1,5 мл пробирка); 2) полимераза (0,5 мл пробирка); 3) 96-луночный планшет - содержит смеси лиофильно-высушенных праймеров и зондов.
Все компоненты набора должны храниться при температуре -20°C в пре-ПЦР зоне лаборатории.