Расширенный набор для проведения ПЦР с "горячим стартом" с полимеразой HS-Taq, 500 е.а.

Расширенный набор для проведения ПЦР с HS-Taq содержит рекомбинантную HS-Taq ДНК-полимеразу, три реакционных буфера и другие необходимые компоненты для проведения ПЦР, за исключением матрицы ДНК и праймеров. В состав набора входят: рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза (5 ед. акт./мкл), 10× ПЦР буфер, 5× Green буфер, 5× GC буфер, 50 мМ MgCl2 (в отдельной пробирке), 50× смесь dNTP и 6×буфер для нанесения на гель.

HS-Taq ДНК-полимераза представляет собой рекомбинантную Taq ДНК-полимеразу, инактивированную специфическими моноклональными антителами. HS-Taq ДНК-полимераза неактивна при температуре до 70 °С. Это позволяет избежать образования неспецифических продуктов и праймер-димеров при низкой температуре на стадии замешивания ПЦР. Активация осуществляется на первом цикле при короткой 5-и минутной инкубации при 95 °С. Рекомбинантная Taq ДНК-полимераза обладает 5´-3´ ДНК-зависимой полимеразной активностью и 5’-3’ экзонуклеазной активностью нативной Taq ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus. Скорость продвижения Taq ДНК-полимеразы зависит от сложности ДНК-матрицы и составляет примерно 1 т.п.о./мин. Рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза идеально подходит для стандартной ПЦР с матрицы до 5 т.п.о.

10× ПЦР буфер оптимизирован для проведения большинства видов ПЦР, в том числе для проведения ПЦР в режиме реального времени с интеркалирующими красителями или флуоресцентными зондами. Буфер химически стабилен, инертен и не меняет оптимальной температуры отжига праймеров или характеристики плавления матрицы.

5× Green буфер содержит маркерные красители (сине-зелёный и жёлтый) и добавки, увеличивающие плотность раствора, для удобного нанесения на гель. Предназначен для стандартной ПЦР с последующей оценкой выхода продуктов по конечной точке (методом разделения продуктов в геле). Буфер химически стабилен, инертен и не меняет оптимальной температуры отжига праймеров или характеристики плавления матрицы.

5× GC буфер разработан для амплификации участков ДНК богатых GC и/или имеющих сложную пространственную структуру. Буфер химически стабилен, содержит вещества, меняющие температуру отжига праймеров и характеристики плавления матрицы.

В состав буферов входят добавки, повышающие время полужизни и процессивность HS-Taq ДНК-полимеразы за счет повышения её стабильности во время ПЦР. Все буферы в 1× концентрации  содержат 1,5 мМ MgCl2.

Входящие в набор 50 мМ раствор MgCl2 и 50× смесь dNTP позволяют легко оптимизировать реакционную смесь под конкретную систему матрица-праймеры.

Инструкция