Назначение: набор Human CXCL1/GRO alpha Quantikine ELISA Kit предназначен для количественного определения человеческого хемокина CXCL1 в образцах супернатантов клеточных культур, сыворотки, плазмы крови методом иммуноферментного анализа.
Диапазон измерения: 10-1000 пг/мл.
Аналитическая чувствительность: 10 пг/мл.
Приложения теста: термин хемокины относится к большому суперсемейству малых (8-10 кДа), индуцибельных секретируемых провоспалительных цитокинов. Эти цитокины характеризуются четырьмя консервативными остатками цистеина и почти все эти цитокины, как было показано, являются хемоаттрактанами и активируют различные субпопуляции лейкоцитов. Хемокиновое семейство цитокинов может быть разделено на четыре субсемейства на основе расположения остатков цистеина. В α-хемокинах или "СХС" субсемействе первые два остатка цистеина разделены любым аминокислотным остатком (аа). В β-хемокинах или "CC" субсемействе первые два цистеиновых остатка являются смежными. Некоторые из наиболее известных членов α-семейства хемокинов: IL-8, GRO, тромбоцитарный фактор 4, β-тромбоглобулин и IP-10. К членам β-семейства хемокинов относят RANTES, MIP-1α, MIP-1β, МСР-1 и I-309. Гены для всех членов человеческих α-хемокинов расположены на хромосоме 4q, в то время как гены β-хемокинов близко связаны на хромосоме 17q. Хемокины действуют, в первую очередь, на лейкоциты, регулируя их движение. В целом, α-хемокины являются хемоаттрактантами предпочтительно для нейтрофилов и активируют нейтрофилы, в то время как β-хемокины обладают свойствами хемотаксиса для моноцитов и Т-клеток.
GROα или CXCL1, был первоначально обнаружен как регулируемый ростом ген, который конститутивно гиперэкспрессируется в опухолевых клетках и транскрибируется в нормальных клетках только при стимуляции роста. Независимо от этого был клонирован фактор активности, стимулирующий рост меланомы (MGSA) из клеточной линии меланомы человека HS294T, и было установлено, что он идентичен человеческому GROα. Кроме того, были дополнительно идентифицированы человеческие GRO-гены, названные GROβ или MIP-2α и GROγ или MIP-2β, которые разделяют с GROα 90% и 86% гомологии аа последовательности, соответственно. Экспрессия GROα индуцируется PDGF и/или различными воспалительными медиаторами, такими как IL-1 и TNF, в моноцитах, фибробластах, меланоцитах, эпителиальных клетках молочной железы и эндотелиальных клетках пупочной вены. GROα также является одним из нескольких нейтрофил-активирующих факторов, полученных из соскоба человеческих псориатических чешуек.
кДНК GROα кодирует белок-предшественник длиной 107 аа, из которых N-концевые 34 аа отщепляются с образованием зрелого GROα длиной 73 аа. В молекуле отсутствуют сайты возможного N-гликозилирования и возможность подвергнуться любым посттрансляционным модификациям зрелого белка. GROα проявляет рост-стимулирующую активность для клеток линии человеческой меланомы HS294T, из которой он был изначально изолирован. В качестве α-хемокина GROα, как и IL-8, является сильным хемоаттрактантом для человеческих нейтрофилов и стимулирует дегрануляцию нейтрофилов и высвобождение ферментов из человеческих нейтрофилов, обработанных цитохалазином. Было показано, что GROα может привести к снижению экспрессии интерстициального коллагена синовиальными фибробластами пациентов с ревматоидным артритом. В экспериментах in vivo GROα вызывал острую воспалительную реакцию у мышей с устойчивостью к эндотоксину при введении в подушечку стопы.
GROα может связываться с высокой аффинностью с рецептором типа II к IL-8, называемым также IL-8 RB, а с рецептором типа I к IL-8 (IL-8 RA) он будет связываться только с низкой аффинностью. Оба рецептора, IL-8 RA и IL-8R B, как и другие рецепторы хемокинов, являются членами суперсемейства родопсин-подобных G-протеин спаренных рецепторов, содержащих семь трансмембранных доменов. Новый GROα-специфический рецептор, который не связывается с IL-8, был также идентифицирован в синовиальных фибробластах и HS294T клетках.